厭氧培養(yǎng)箱操作室厭氧環(huán)境形成
操作室厭氧環(huán)境形成
1 按使用要求放置好必要的配件和器具，并向操作室內(nèi)放入二個無毒塑料袋。
2 通電源開照明燈，開控溫儀，調(diào)節(jié)所需溫度及安全溫度。
3 操作室內(nèi)放入1000g鈀粒(封閉)和500g干燥劑,并放入美蘭指示劑(封閉)。
4 關緊取樣室內(nèi)外門，并抽真空校驗。
5 操作室內(nèi)次置換（氮氣置換）：
（1）先用橡皮管插入操作室內(nèi)進氣口，另一頭插入塑料袋。
（2）接通氮氣進氣路，打開氮氣控制閥，使二只塑料袋充足氮氣，然后扎緊袋口。
（3）把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊。
（4）把塑料袋內(nèi)氮氣漸漸地放于操作室內(nèi)，至全部放出。
6 操作室D二次置換（氮氣置換）重復一 次充氮過程，并注意隨時用腳踏開關開閉排氣。
7 操作室D三次置換（混合氣體置換）：
（混合氣體配比為：N2↑ 85% H2 ↑ 10% CO2↑ 5%）
（1）調(diào)換氣路打開混合氣道通閥門進氣，充氣時要隨時腳踏開關開閉排氣。
（2）混合氣充滿塑料袋后，關掉混合氣直通閥（三通閥），使混合氣經(jīng)過流量計輸入操作并調(diào)整流量計，流量為每分鐘10毫升左右。
（3）把塑料袋內(nèi)混合氣漸漸排于操作室內(nèi)。
（4）通過三次換氣后，操作室內(nèi)氣體含氧量已處于微量狀態(tài)。
8 操作室內(nèi)打開鈀粒除氧劑，接通除氧催化器電源進行催化除氧，一 小時后打開美蘭指示劑（美蘭安瓶）觀察其變色，不變色為操作室內(nèi)達到厭氧環(huán)境。
9 開紫外線滅菌燈，室內(nèi)進行滅菌處理。滅菌時間自定。
二、菌種的置入和培養(yǎng)
1 檢查取樣室內(nèi)門并關緊之。
2 打開取樣室外門，將菌種放入取樣室后即關上外門。
3 取樣室充氮置換三次過程：先抽真空度500毫米汞柱（66Kpa）以上停,然后人工打開氮氣閥門進氣,使指針回復零位后進行下次操作。
4 如選定真空度較低就需要增加置換的次數(shù)。
5 取樣室內(nèi)外門開啟，關緊要抽低真空度100毫米汞柱（13 Kpa）檢驗及幫助操作。
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